迪恩（簡森·阿克斯 Jensen Ackles 飾）和薩姆（賈德·帕達里克 Jared Padalecki 飾）終於找到父親約翰（傑弗瑞·迪恩·摩根 Jeffrey Dean Morgan 飾），但為了救迪恩，約翰甘願深入地獄，留下兄弟兩個繼續完成「獵人」職責。同時兄弟倆也了解到「黃眼惡魔」的存在，開始一路追蹤這個最大仇人。二人解決了一個又一個超自然生物，兄弟二人的性格、理想分歧也一直存在，不時吵吵鬧鬧。但薩姆終究是黃眼惡魔的唯一目標，為了薩姆可以好好活下去，迪恩不惜和惡魔做交易，用自己的靈魂換回薩姆的生命……